RNAStay? RNA保護(hù)穩(wěn)定劑
1. 產(chǎn)品介紹
RNA降解是生命科學(xué)研究中一個(gè)嚴(yán)重的問(wèn)題,并且很難防止其發(fā)生。因?yàn)樵谥苽浼兓虮4?/span>RNA時(shí),很難防止沒(méi)有RNA水解酶的污染。而RNA水解酶即使在250 ? C高溫或-80 ? C,甚至液氮的保存條件下,仍然有活力導(dǎo)致RNA逐步降解。針對(duì)這一問(wèn)題Crystalgen公司研發(fā)出具有廣譜保護(hù)RNA不被降解的試劑RNAStay?。
RNAStay?是一種無(wú)毒,無(wú)味的液體試劑,可廣泛應(yīng)用于細(xì)胞,組織和器官和純化后需冷藏的RNA分子。用RNAStay?處理過(guò)或保藏在RNAStay?中的樣品匹配各種隨后的各種應(yīng)用,例如分離mRNA或全部RNA大分子純化分離的各種藥盒,例如基于酚 (phenol) 類的純化步驟或試劑。RNAStay?處理和保存的樣品可用于各類研究,如分子生物學(xué),組織學(xué),免疫組化,及免疫細(xì)胞學(xué)化學(xué),或長(zhǎng)期貯藏于低溫下保存。
2. 產(chǎn)品特點(diǎn)及優(yōu)勢(shì)
a. 方便快速:可在室溫下工作,快速滲入細(xì)胞或組織,保護(hù)細(xì)胞內(nèi)完整的RNA。
b. 高質(zhì)量:可得到高質(zhì)量的RNA或mRNA。
c. 穩(wěn)定:可在室溫下保護(hù)樣品完整的RNA分子,長(zhǎng)達(dá)1-4星期。如需要長(zhǎng)期保存,可置于-20? C 或 -80 ? C低溫下。
d. 安全:無(wú)毒,無(wú)味液體,無(wú)需特殊存放。
3. 使用方法
a. 小體積組織或器官,例如鼠脾臟,腎臟,肝等可直接置于RNAStay?。較大的器官或組織,可切至0.5 – 20px的大小,然后加入RNAStay?。RNAStay?體積通常是樣品體積的5 – 6倍。
b. 快速用RNAStay?沖洗。
c. 樣品浸入RNAStay?中5 – 10分鐘或更長(zhǎng) (可長(zhǎng)達(dá)數(shù)周),當(dāng)需要分離RNA時(shí),從RNAStay?中取出樣品,即可進(jìn)行下一步工作。
d. 對(duì)于細(xì)胞的儲(chǔ)藏,用1 X的PBS沖洗保存,加入 (動(dòng)物,植物,微生物細(xì)胞) 5 – 10 倍體積的RNAStay?,離心>5000rpm10分鐘,收集細(xì)胞小團(tuán),(Pellet),即可進(jìn)行下一步工作。
4. 注意事項(xiàng)
a. RNAStay?僅使適用新鮮樣品,不能使用于冰凍樣品。
b. 大多數(shù)樣品在RNAStay?溶液中可再室溫下儲(chǔ)存1 – 4星期。在-20?C 或-80?C下,可無(wú)限期保藏。
c. 新鮮樣品置入RNAStay? 中后,不能立即冷凍,需在室溫或4 ? C下過(guò)夜,第二天再置入 -20 ? C 或 -80 ? C低溫儲(chǔ)藏,效果最佳。
d. 植物組織由于具有細(xì)胞壁應(yīng)延長(zhǎng)在室溫下RNAStay?中的處理時(shí),有助于RNAStay?全面滲入植物細(xì)胞,保護(hù)其RNA不被降解。
5. RNAStay?儲(chǔ)藏
a. 室溫,陰涼干燥處。
b. 如有沉淀,可加熱至45 ? C,搖勻后功能不變。
6. 廢物處理
使用后的RNAStay? 可安全的倒入水槽,用自來(lái)水沖掉即可。
7. 禁止提示
RNAStay? 不能與氧化劑合用。
8. 重要提示
RNA水解酶的失活與重激活是可逆的。因此RNAStay?的樣品處理后不能用水沖洗。樣品在使用前用棉簽吸取樣品上多余的RNAStay?溶液。如果樣品是細(xì)胞,可采用離心的方法,取用離心后下來(lái)的細(xì)胞團(tuán)。
參考
1. RNAStay?. 美國(guó)專利商標(biāo)局。注冊(cè)號(hào):3,863,954. 注冊(cè)時(shí)間 2010年10月19日。
2. MSDS:見(jiàn)www.crystalgen.com, m.knightvisionseminars.com.